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分配色谱与交换色谱检测

时间:2020-07-31 10:21:06来源:本站

1.原理

分配色谱利用固定相与流动相之间对待分离组分溶解度的差异来实现分离。分配色谱的固定相一般为液相的溶剂,依靠图布、键合、吸附等手段分布于色谱柱或者担体表面。分配色谱过程本质上是组分分子在固定想和流动相之间不断达到溶解平衡的过程。

液液分配色谱用载体主要有硅胶、硅藻土、及纤维素等。通常,分离水溶性成分或极性较大的成分入生物碱、苷类、糖类、有机酸等化合物时,固定相多采用强极性溶剂,如水、缓冲溶液等,流动相则采用氯仿、乙酸乙酯、丁醇等弱极性有机溶剂,称之为正相色谱;但当分离脂溶性化合物时,如高级脂肪酸、油脂、游离甾体等时、则两相可以颠倒,固定相可以用石蜡油,而流动相则用水或甲醇等强极性溶剂,故称之为反相分配色谱。

2.支持剂

常用的有硅胶、硅藻土、纤维素粉、和滤纸等。

常用反相硅胶薄层色谱及柱色谱的填料系将普通硅胶经下列方式进行化学修饰,键合上长度不同的烃基形成亲脂性表面。

乙基、辛基、或十八烷基亲脂性顺序如下:RP-18> RP-8 > RP-2


分配色谱与交换色谱检测


3.操作方式

分配薄层层析法是指根据各种成分在固定相(液)和移动相(液)两相间的分配系数不同而达到相互分离的一种色谱法。

离子交换色谱利用被分离组分与固定相之间发生离子交换的能力诧异来实现分离。离子交换色谱的固定相一般为离子交换树脂,树脂分子结构中存在许多可以电离的活性中心,待分离组分中的离子会与这些活性中心发生离子交换,形成离子交换平衡,从而在流动相与固定相之间形成分配。固定相的固有离子与待分离组分中的离子之间相互争夺固定相中的离子交换中心,并随着流动相的运动而运动,最终实现分离。

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